PCR анализ: какво е това? Как да направите теста за PCR правилно

Не толкова отдавна, надежден,много чувствителен и бърз метод за диагностициране на различни инфекциозни заболявания на човек. Този метод се нарича "PCR анализ". Какво е това, каква ще бъде същността му, какви микроорганизми може да разкрие и как да я предаде правилно, ще кажем в нашата статия.

История на откритието

Изобретено е методът на полимеразна верижна реакция (PCR)Американски учен Cary Myullis през 1983 г. Първоначално е патентовал метода за диагностициране от страна на компанията "Cetus Corporation", в която създателят му работи. През 1992 г. всички права и патенти бяха продадени на компанията "Hoffman-La Roche". След това се оказа, че паралелни подобни изследвания са били проведени и са записани от други американски биолози, като Алис Чен, Дейвид Едгар, Джон Трейл. През 1980 г. съветските учени А. Слюсаренко, А. Каледдин и С. Городецки се занимават с този проблем. Следователно не беше възможно да се определи единственият притежател на права. Много изявени биохимици допринесоха за развитието на метода на полимеразна верижна реакция и патентоваха иновациите си. В момента PCR анализът се извършва навсякъде в специално оборудвани лаборатории.

РЕЗЮМЕ PCR диагностика

PCR анализ: какво е това и как работи? Същността на метода е да се увеличи в специфична микробна среда чрез специален ензим на ДНК полимеразата при изкуствени условия. За да направите това, умножете съществуващия ДНК материал. Така, в присъствието на патогенен микроорганизъм в пробата, количеството му ще бъде увеличено чрез биохимични лабораторни манипулации и бактерията може лесно да бъде открита в микроскоп.

PCR анализ - какво е това?

Как се извършва материалното изследване?

Анализът изисква:

  • шаблон ДНК;
  • праймери, свързващи краищата на фрагмента от материал;
  • термично стабилен ДНК полимеразен ензим;
  • химични вещества, които гарантират правилното функциониране на ензимите;
  • буферен разтвор, необходим за създаване на подходящи условия за растежа и развитието на ДНК материал.

    PCR анализ 12

За извършване на PCR се извършват 25-30 повторения, състоящи се от три етапа: денатуриране, отгряване и удължаване.

За анализ на полимеразната верижна реакцияизползвайте специално устройство - усилвател. Съвременното оборудване ви позволява да настроите необходимата програма за отопление и охлаждане на тръбите, за да премахнете грешките по време на диагностиката.

Къде се използва диагнозата?

Методът на полимеразна верижна реакция се използва в различни области на медицината:

  • Съдебните учени го използват, за да идентифицират генетичен материал, като коса, слюнка или кръв;
  • PCR анализът на кръвта помага за генотипизиране, например, за откриване на индивидуална генетично инженерна реакция към конкретно лекарство;
  • с помощта на такъв метод установяват съществуването на семейни връзки между хората;
  • най-популярният PCR метод е станал в медицинската диагностика за дефинирането на различни инфекциозни заболявания.

Какви инфекции разкриват PCR?

Така че, медицината отдавна и успешно е използвала анализа на PCR. Какво е това, вече научихме. И какви патогени могат да бъдат открити с него? Следните инфекциозни заболявания се диагностицират чрез PCR:

  • хепатит А, В, С;
  • ureaplasmosis;
  • кандидоза;
  • хламидия;
  • микоплазмоза;
  • бактериална вагиноза;
  • инфекциозна мононуклеоза;
  • трихомониаза;
  • папиломавирусна инфекция;
  • туберкулоза;
  • херпес инфекция на І и ІІ тип;
  • Helicobacter Pylori инфекция;
  • цитомегаловирус;
  • дифтерия;
  • салмонелоза;
  • ХИВ инфекция.

    PCR анализ за ХИВ

Също така, PCR методи се използват при диагностицирането на рак.

Предимствата на метода

Диагностичната PCR има няколко предимства:

  1. Висока чувствителност. Дори само с няколко ДНК молекули на микроорганизма, PCR анализът определя наличието на инфекция. Методът ще помогне при хронични и латентни заболявания. Често в такива случаи микроорганизмът е некултивиран по други начини.
  2. За изследването е подходящ всеки материал, като слюнка, кръв, пол, коса, епителни клетки. Най-често срещан е кръвен тест и урогенитално намазка при PCR.

    PCR: вземете теста

  3. Тя не изисква продължително отглеждане на култури. Автоматизираният диагностичен процес ви позволява да получите резултатите от изследването след 4-5 часа.
  4. Методът е почти 100% надежден. Проведени са само единични случаи на фалшив отрицателен резултат.
  5. Способността да се идентифицират няколко видапатогени от единична проба от материал. Това не само ускорява процеса на диагностициране на заболяването, но също така значително намалява разходите за материали. Често лекарят предписва подробен PCR анализ. Цената на изследването, състояща се от дефиницията на шест патогени, е около 1500 рубли.

Препоръки за подготовка на анализа

Резултатите да бъдат валидни проучванията PCR трябва да бъдат изпитвани, следвайки препоръките на предварителните препарати за диагностика:

  1. Преди да се откажете от слюнката, трябва да се въздържате от приемане на храна и лекарства 4 часа преди да вземете материала. Веднага преди процедурата, изплакнете устата си с преварена вода.
  2. Горните правила трябва да се следват, когато се взема проба от вътрешната повърхност на бузата. След изплакване се препоръчва да се направи лек масаж на кожата, за да се изолира секрецията на жлезата.
  3. Урината обикновено се събира у дома. За да направите това, трябва да проведете цялостна тоалетна на гениталиите. Необходимо е да се съберат 50-60 ml урина в стерилен пластмасов контейнер. За да се гарантира чистотата на материала, се препоръчва жените да поставят тампон във влагалището, а мъжете максимално да издърпват кожната гънка. Не можете да вземете материала по време на менструалния поток.
  4. За сперматозоидите трябва да се въздържате от сексуалниДействайте 3 дни преди събирането. Също така, лекарите съветват да откажат да посетят сауната и да вземат гореща вана, да пият алкохол и пикантна храна. 3 часа преди теста, трябва да се въздържате от уриниране.
  5. За доставка на урогенитално намазка, например акосе извършва анализ на хламидиалната PCR, както жените, така и мъжете се препоръчват сексуална почивка за 3 дни. 2 седмици преди теста не трябва да се вземат антибактериални лекарства. За една седмица трябва да спрете използването на интимни гелове, мехлеми, вагинални супозитории, спринцовки. 3 часа преди теста, трябва да се въздържате от уриниране. По време на менструацията, събирането на материала не се извършва, само 3 дни след прекратяване на кръвообращението може да се направи урогенитално намазка.

PCR по време на бременност

В периода на очакване на бебето много инфекциозниПолово предаваните заболявания са изключително опасни за нормалното развитие на плода. СБМ могат да предизвикат вътрематочно забавяне на растежа, спонтанен аборт или преждевременно раждане, вродени малформации на детето. Поради това е изключително важно да се премине ранно PCR тест. Необходимо е анализът да бъде представен при регистрация - до 12 седмици.

Анализ на Chlamydia PCR

Ограждащият материал произхожда от цервикалния каналс помощта на специална четка. Процедурата е безболезнена и не представлява опасност за бебето. Обикновено по време на бременност хламидията се анализира чрез PCR метода, както и уреаплазмоза, микоплазмоза, цитомегаловирус, херпес и папиломавирус. Такъв комплекс от изпити се нарича PCR-6.

PCR за ХИВ диагноза

Във връзка с факта, че методът на полимеразната верижна реакцияреакцията е много чувствителна към промените в тялото и условията на диагнозата, много фактори могат да повлияят на резултата. Поради това PCR анализът за HIV инфекцията не е надежден метод, неговата ефективност е 96-98%. В останалите 2-4% от случаите, тестът дава фалшиви положителни резултати.

Но в някои ситуации без PCR диагностика на ХИВда не се управлява. Обикновено се прилага при хора с фалшиво отрицателен резултат от ELISA. Такива показатели показват, че човекът все още не е развил антитела срещу вируса и те не могат да бъдат открити без многократно увеличаване на броя. Това може да се постигне чрез провеждане на кръвен тест, като се използва PCR метод.

Също така, тази диагноза е необходима за деца от първата година от живота, които са родени от HIV-позитивна майка. Методът е единственият начин за надеждно определяне на състоянието на детето.

PCR за диагностициране на хепатит

Методът на полимеразната верижна реакция позволяваоткрива ДНК на вируса на хепатит А, В, С дълго преди образуването на антитела срещу инфекция или появата на симптоми на заболяването. Особено ефективен е анализът на PCR за хепатит С, тъй като в 85% от случаите подобно заболяване протича безсимптомно и без навременното лечение преминава в хроничен стадий.

PCR кръвен тест

Навременното откриване на патогена ще помогне да се избегнат усложнения и продължително лечение.

Изчерпателно изследване на PCR

Комплекс PCR анализ: какво е това? Този тест метод polimezarnoy верижна реакция, която включва определяне едновременно няколко вида инфекция: Mycoplasma genitalium, Mycoplasma Hominis, Gardnerella Vaginalis, Candida, Trichomonas, цитомегаловирус, Ureaplasma urealitikum, херпес първи и втори тип, гонорея папиломавирус. Цената на тази диагноза варира от 2000 до 3500 рубли. в зависимост от клиничната практика, материали и оборудване, както и от вида на анализа: количествени и качествени. Какво е необходимо, във вашия случай - лекарят реши. В някои случаи, може просто се открие наличието на патогена в други, като ХИВ, на важната роля на количествен титър. по-нататък "PCR анализ на 12" при диагностицирането на всички по-горе изследване патогени.

Обяснение на резултатите от анализа

Декодирането на PCR анализа не е трудно. Има само 2 скали на индикатора - "положителен резултат" и "отрицателен резултат". Ако се открие патоген, лекарите могат да потвърдят наличието на заболяването с 99% увереност и да продължат лечението на пациента. В количествения метод за определяне на инфекцията в съответната колона ще бъде показана цифровата стойност на откритите бактерии. Само лекарят може да определи степента на заболяването и да предпише необходимото лечение.

Къде да мине PCR анализ?

В някои случаи, например, при определянетоHIV инфекцията по метода на PCR, с отрицателен резултат, е необходимо да се проведат допълнителни изследвания, за да се потвърдят резултатите.

Къде да направите анализа?

Къде да се подаде PCR анализ: в държавната поликлиника или в частна лаборатория? За съжаление в общинските лечебни заведения оборудването и методите често са остарели. Поради това е по-добре да се даде предимство на частните лаборатории със съвременно оборудване и висококвалифициран персонал. Освен това в частна клиника ще получите резултати много по-бързо.

В Москва предлагат много частни лабораториипровеждане на PCR анализ на различни инфекции. Например, в клиники като Вита, Комплексна клиника, Happy Family и Uro-Pro се извършва PCR анализ. Цената на изпита е от 200 рубли. за дефиницията на един патоген.

Може да се заключи, че диагнозата на инфекциозниPCR в повечето случаи е бърз и надежден начин за откриване на патогена в организма в ранните етапи на инфекцията. Но в някои случаи е полезно да изберете други методи за диагностика. Необходимостта от провеждането на такова проучване може да бъде определена само от специалист. Декодирането на PCR анализа също изисква професионален подход. Следвайте препоръките на лекаря и не давайте тестове, които не са необходими.

хареса:
0
Анализ на урината от Nechiporenko. Как да го сглобим
Общ анализ на урината. Как да вземем и каква е нормата?
Как се изследва окултната кръв на фекалиите?
Къде да вземем кърлежите за анализ? Какво да правя, когато
Колко правилно е да предадете анализа на изпражненията и дали е необходимо
Как да правим правилно кръвта на хормоните?
Може да се вземе кръвен тест за ХИВ
Как да подадете правилно теста за урината?
Какво ще каже анализът на урината (декодиране)
Топ публикации
нагоре